<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE article PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.3 20210610//EN" "JATS-journalpublishing1-3.dtd">
<article article-type="research-article" dtd-version="1.3" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xml:lang="ru"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">mes</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="ru">Экстремальная биомедицина</journal-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Extreme Medicine</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn pub-type="ppub">3033-8964</issn><issn pub-type="epub">3033-8972</issn><publisher><publisher-name>Centre for Strategic Planning of the Federal Medical and Biological Agency</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="doi">10.47183/mes.2024.026</article-id><article-id custom-type="elpub" pub-id-type="custom">mes-71</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="heading"><subject>Research Article</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="ru"><subject>ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="en"><subject>ORIGINAL RESEARCH</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title>Методика оценки влияния растворов биологически активных веществ на коагуляцию</article-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Method to assess the effects of bioactive compounds solutions on blood clotting</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Манувера</surname><given-names>В. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Manuvera</surname><given-names>V. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Валентин Александрович Манувера</p><p>ул. Малая Пироговская, д. 1А, г. Москва, 119435</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Valentin A. Manuvera</p><p>Malaya Pirogovskaya, 1A, Moscow, 119435</p></bio><email xlink:type="simple">vmanuvera@yandex.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Бровина</surname><given-names>К. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Brovina</surname><given-names>K. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>ул. Малая Пироговская, д. 1А, г. Москва, 119435</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Malaya Pirogovskaya, 1A, Moscow, 119435</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Бобровский</surname><given-names>П. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Bobrovsky</surname><given-names>P. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>ул. Малая Пироговская, д. 1А, г. Москва, 119435</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Malaya Pirogovskaya, 1A, Moscow, 119435</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Графская</surname><given-names>Е. Н.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Grafskaia</surname><given-names>E. N.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>ул. Малая Пироговская, д. 1А, г. Москва, 119435</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Malaya Pirogovskaya, 1A, Moscow, 119435</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Харлампиева</surname><given-names>Д. Д.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Kharlampieva</surname><given-names>D. D.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>ул. Малая Пироговская, д. 1А, г. Москва, 119435</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Malaya Pirogovskaya, 1A, Moscow, 119435</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Лазарев</surname><given-names>В. Н.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Lazarev</surname><given-names>V. N.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>ул. Малая Пироговская, д. 1А, г. Москва, 119435</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Malaya Pirogovskaya, 1A, Moscow, 119435</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff-1"><aff xml:lang="ru"><institution>Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины имени Ю. М. Лопухина Федерального медико-биологического агентства; Московский физико-технический институт (национальный исследовательский университет)</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Lopukhin Federal Research and Clinical Center of Physical-Chemical Medicine of the Federal Medical Biological Agency; Moscow Institute of Physics and Technology (National Research University)</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff-2"><aff xml:lang="ru"><institution>Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины имени Ю. М. Лопухина Федерального медико-биологического агентства</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Lopukhin Federal Research and Clinical Center of Physical-Chemical Medicine of the Federal Medical Biological Agency</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><pub-date pub-type="collection"><year>2024</year></pub-date><pub-date pub-type="epub"><day>23</day><month>10</month><year>2024</year></pub-date><volume>26</volume><issue>2</issue><fpage>120</fpage><lpage>124</lpage><permissions><copyright-statement>Copyright &amp;#x00A9; Манувера В.А., Бровина К.А., Бобровский П.А., Графская Е.Н., Харлампиева Д.Д., Лазарев В.Н., 2024</copyright-statement><copyright-year>2024</copyright-year><copyright-holder xml:lang="ru">Манувера В.А., Бровина К.А., Бобровский П.А., Графская Е.Н., Харлампиева Д.Д., Лазарев В.Н.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="en">Manuvera V.A., Brovina K.A., Bobrovsky P.A., Grafskaia E.N., Kharlampieva D.D., Lazarev V.N.</copyright-holder><license xml:lang="ru" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.</license-p></license><license xml:lang="en" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.</license-p></license></permissions><self-uri xlink:href="https://www.extrememedicine.ru/jour/article/view/71">https://www.extrememedicine.ru/jour/article/view/71</self-uri><abstract><p>Поиск новых антикоагулянтов требует простых и недорогих методов первичного определения их активности. Для лабораторной оценки состояния системы гемостаза широко используют клоттинговые тесты, т. е. модельные исследования, оценивающие с клинической точки зрения состояние системы гемостаза по скорости образования фибринового сгустка. Реактивы и приборы для их выполнения производят в России, они имеют низкую себестоимость и просты в применении, однако для исследования активности антикоагулянтов в методики измерения необходимо внести некоторые изменения. Целью работы было показать работоспособность протокола тестирования антикоагуляционной активности растворов с помощью модифицированных стандартных клинических тестов на измерение активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ), протромбинового времени (ПВ) и тромбинового времени (ТВ). Использовали реактивы для измерения АЧТВ, ТВ и ПВ, а также гепарин отечественного производства и два рекомбинантных белка-антикоагулянта медицинской пиявки, полученные в нашей лаборатории. Проводили клоттинговые тесты с добавлением в реакционную смесь антикоагулянтов, определяли работоспособность и границы применимости использованных методов. При исследовании гирудина, гепарина и цистеин-богатого антикоагулянта медицинской пиявки с помощью измерения АЧТВ, ТВ и ПВ продемонстрировано дозо-зависимое увеличение времени образования сгустков. Определена совместимость методов с использованием некоторых распространенных компонентов буферных растворов, используемых в биохимических исследованиях. Показано, что после небольших модификаций стандартных клоттинговых методов определения параметров гемостаза можно использовать их для тестирования растворов новых потенциальных антикоагулянтов.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="en"><p>The search for new anticoagulants requires simple and affordable methods for primary determination of their activity. Clotting tests are widely used for laboratory evaluation of the hemostatic system. These are model studies that assess the state of the hemostatic system from a clinical point of view based on the fibrin clot formation time. Reagents and instruments for such tests are produced in Russia, they have low manufacturing cost and are easy to use. However, it is necessary to make a few modifications to the measurement methods to assess the anticoagulant activity. The study was aimed to demonstrate performance of the protocol for testing the solution anticoagulant activity using the modified standard clinical tests involving measurement of the activated partial thromboplastin time (aPTT), prothrombin time (PT), and thrombin time (TT). Reagents for measurement of aPTT, PT, and TT were used, along with the domestically produced heparin and two recombinant anticoagulant proteins from the medicinal leech obtained in our laboratory. Clotting tests were performed with the addition of anticoagulants to the reaction mixture were performed; performance and applicability limits of the methods used were determined. When studying hirudin, heparin, and cysteine-rich anticoagulant of medical leech using measurement of aPTT, TT, and PT, a dose-dependent increase in clotting time was demonstrated. The methods’ compatibility with the use of various common components of buffer solutions used in biochemical tests was determined. It was shown that the slightly modified standard blood clotting tests for determination of hemostatic parameters could be used to test new potential anticoagulants.</p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>активированное частичное тромбопластиновое время</kwd><kwd>протромбиновое время</kwd><kwd>тромбиновое время</kwd><kwd>антикоагулянт</kwd><kwd>пиявка</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="en"><kwd>activated partial thromboplastin time</kwd><kwd>prothrombin time</kwd><kwd>thrombin time</kwd><kwd>anticoagulant</kwd><kwd>leech</kwd></kwd-group><funding-group><funding-statement xml:lang="ru">Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 23-25-00006, https://rscf.ru/project/23-25-00006/.</funding-statement><funding-statement xml:lang="en">The study was supported by the Russian Science Foundation grant No. 23-25-00006, https://rscf.ru/project/23-25-00006/.</funding-statement></funding-group></article-meta></front><back><ref-list><title>References</title><ref id="cit1"><label>1</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Баркаган З. С. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. Москва: ООО "Медико-технологическое предприятие «Ньюдиамед», 2008; 292 с.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Barkagan ZS. Diagnostika i kontroliruemaja terapija narushenij gemostaza. Moskva: OOO "Mediko-tehnologicheskoe predprijatie «N'judiamed», 2008; 292 s. Russian.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit2"><label>2</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Winter W, Flax S, Harris N. Coagulation testing in the core laboratory. Laboratory Medicine. 2017; 48 (4): 295–313. Available from: https://doi.org/10.1093/labmed/.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Winter W, Flax S, Harris N. Coagulation testing in the core laboratory. Laboratory Medicine. 2017; 48 (4): 295–313. Available from: https://doi.org/10.1093/labmed/.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit3"><label>3</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Макаров В. А., Спасов А. А., Плотников М. Б., Белозерская Г. Г., Васильева Т. М., Дрозд Н. Н., и др. Методические рекомендации по изучению лекарственных средств, влияющих на гемостаз. В книге: Миронов А. Н., Бунятян Н. Д., Васильев А. Н., Верстакова О. Л., Журавлева М. В., Лепахин В. К., и др, редакторы. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. М.: Гриф и К, 2012; с. 453–479.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Makarov VA, Spasov AA, Plotnikov MB, Belozerskaja GG, Vasileva TM, Drozd NN, i dr. Metodicheskie rekomendacii po izucheniju lekarstvennyh sredstv, vlijajushhih na gemostaz. V knige: Mironov AN, Bunjatjan ND, Vasil'ev AN, Verstakova OL, Zhuravleva MV, Lepahin VK, i dr, redaktory. Rukovodstvo po provedeniju doklinicheskih issledovanij lekarstvennyh sredstv. Chast' pervaja. M.: Grif i K, 2012; s. 453–479. Russian.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit4"><label>4</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Manuvera VA, Kharlampieva DD, Bobrovsky PA, Grafskaia EN, Brovina KA, Lazarev VN. New anticoagulant protein from medicinal leech. Biochemical and Biophysical Research Communications. 2024; 696: 149473. Available from: https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2024.149473</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Manuvera VA, Kharlampieva DD, Bobrovsky PA, Grafskaia EN, Brovina KA, Lazarev VN. New anticoagulant protein from medicinal leech. Biochemical and Biophysical Research Communications. 2024; 696: 149473. Available from: https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2024.149473</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit5"><label>5</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Nutt EM, Jain D, Lenny AB, Schaffer L, Siegl PK, Dunwiddie CT, Purification and characterization of recombinant antistasin: a leech-derived inhibitor of coagulation factor Xa, Arch Biochem Biophys. 1991; 285: 37–44. Available from: https://doi.org/10.1016/0003-9861(91)90325-D.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Nutt EM, Jain D, Lenny AB, Schaffer L, Siegl PK, Dunwiddie CT, Purification and characterization of recombinant antistasin: a leech-derived inhibitor of coagulation factor Xa, Arch Biochem Biophys. 1991; 285: 37–44. Available from: https://doi.org/10.1016/0003-9861(91)90325-D.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit6"><label>6</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Müller C, Mescke K, Liebig S, et al. More than just one: multiplicity of Hirudins and Hirudin-like Factors in the Medicinal Leech, Hirudo medicinalis. Mol Genet Genomics. 2016; 291: 227–240. Available from: https://doi.org/10.1007/s00438-015-1100-0.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Müller C, Mescke K, Liebig S, et al. More than just one: multiplicity of Hirudins and Hirudin-like Factors in the Medicinal Leech, Hirudo medicinalis. Mol Genet Genomics. 2016; 291: 227–240. Available from: https://doi.org/10.1007/s00438-015-1100-0.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit7"><label>7</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Onishi A, St Ange K, Dordick JS, Linhardt RJ. Heparin and anticoagulation. Front Biosci Landmark Ed. 2016; 21 (7): 1372– 92. Available from: https://doi.org/10.2741/4462.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Onishi A, St Ange K, Dordick JS, Linhardt RJ. Heparin and anticoagulation. Front Biosci Landmark Ed. 2016; 21 (7): 1372–92. Available from: https://doi.org/10.2741/4462.</mixed-citation></citation-alternatives></ref></ref-list><fn-group><fn fn-type="conflict"><p>The authors declare that there are no conflicts of interest present.</p></fn></fn-group></back></article>
