Разработка технологии получения плазмы методом иммуносорбции: in vitro оценка эффективности удаления анти-A/анти-B антител и сохранности активности фактора VIII

Введение. Трансфузия плазмы остается неотъемлемым компонентом интенсивной терапии массивной кровопотери, коагулопатий и синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания, особенно в экстренных ситуациях, когда группа крови реципиента неизвестна или время на ее определение отсутствует, использование группоспецифической плазмы невозможно, а ресурс плазмы группы AB(IV) ограничен и составляет около 4–5% донорского ресурса. Под «универсальной плазмой» в настоящей работе понимается компонент донорской крови, пригодный для применения у реципиента любой группы по системе AB0 без предварительного определения его групповой принадлежности как для восполнения объема циркулирующей крови, так и для коррекции гемостаза. Одно из перспективных направлений создания такого продукта — иммуносорбция анти-А/анти-В антител, однако отечественные данные о ее влиянии на лабильные факторы гемостаза, прежде всего фактор VIII (Ф.VIII), единичны.

Цель. Оценка возможности использования иммуносорбента для получения из свежезамороженной плазмы (СЗП) компонента, свободного от анти-А/анти-В антител или содержащего их на ультранизком уровне (≤ 1:8), с сохранной активностью лабильных факторов гемостаза, пригодного для применения у пациентов независимо от их групповой принадлежности по системе AB0, в том числе для коррекции гемостаза.

Материалы и методы. Исследование выполнено на образцах СЗП in vitro с парным сравнением показателей «до/после» обработки. Исследовано 90 образцов СЗП (по 30 образцов в группах 0, A и B). Сорбцию анти-А/анти-В антител проводили иммуносорбентами (НПФ «ПОКАРД», Россия) в закрытой системе при +22…+25 °C в объеме плазмы 100 мл и времени контакта 30 мин. Титры антител класса IgM определяли в реакции прямой агглютинации в гелевых картах, антител IgG — в непрямом антиглобулиновом тесте; активность фактора VIII (Ф.VIII:C) — по АЧТВ (активированное частичное тромбопластиновое время) на коагулометре. Статистический анализ произведен с помощью U-критерия Манна — Уитни; различия считали значимыми при p < 0,05.

Результаты. При исходных титрах анти-А и анти-В антител ≤ 1:32 после сорбции антитела элиминировались полностью; при титрах > 1:32–1:512 их уровень снижался до 1:2–1:8, что соответствует международным критериям «ultra low-titer» плазмы. Активность Ф.VIII после сорбции снижалась во всех группах, технологические потери составили 18–20%. Исходная активность Ф.VIII в плазме группы 0 была достоверно ниже, чем в группах A и B. После сорбции все образцы плазмы групп A и B сохраняли соответствие регуляторному критерию (Ф.VIII ≥ 0,7 МЕ/мл), тогда как до 50% образцов группы 0 не достигали требуемого минимума и не могли маркироваться как СЗП.

Выводы. Иммуносорбция обеспечила эффективное удаление анти-А/анти-В антител из СЗП, однако была сопряжена с потерей Ф.VIII на 18–20%, критичной преимущественно для плазмы группы 0. Разработка технологии производства «универсальной плазмы» данным методом целесообразна для продукта специального (целевого) назначения — для экстренной догоспитальной помощи, военной медицины и формирования стратегических запасов — при условии прескрининга доноров группы 0 с исходной активностью Ф.VIII ≥ 95% и/или переформатирования продукта в лиофилизированную «универсальную плазму».

1. Жибурт ЕБ, Попова ВИ, Иванова ИВ, Рейзман ПВ. Скрининг антиэритроцитарных антител и другие практические вопросы иммуносерологии. Трансфузиология. 2004;5(4):72–9. EDN: SFQGVN

2. Liumbruno GM, Franchini M. Solvent/detergent plasma: pharmaceutical characteristics and clinical experience. Journal of Thrombosis and Thrombolysis. 2015;39:118–28. https://doi.org/10.1007/s11239-014-1086-1

3. Raster J, Jacob M, Greinacher A, Aurich K. Plasma isoagglutinin depletion for blood group independent plasma transfusion. Transfusion Medicine and Hemotherapy. 2022;49(5):280–7. https://doi.org/10.1159/000521217

4. Heger A, Brandstätter H, Prager B, Brainovic J, Cortes R, Römisch J. Universal pooled plasma (Uniplas®) does not induce complement-mediated hemolysis of human red blood cells in vitro. Transfusion and Apheresis Science. 2015;52(1):128–35. https://doi.org/10.1016/j.transci.2013.04.039

5. Hellstern P, Solheim BG. The use of solvent/detergent treatment in pathogen reduction of plasma. Transfusion Medicine and Hemotherapy. 2011;38(1):65–70. https://doi.org/10.1159/000323552

6. Zur M, Glassberg E, Gorenbein P, Epstein E, Eisenkraft A, Misgav M, et al. Freeze-dried plasma stability under prehospital field conditions. Transfusion. 2019;59(11):3485–90. https://doi.org/10.1111/trf.15533

7. Эйхлер ОВ, Сидоркевич СВ, Касьянов АД, Кробинец ИИ, Бодрова НН, Матвиенко ОЮ. Лиофилизированная плазма: современное состояние и перспективы развития. Трансфузиология. 2023;24(4):334–42. EDN: BWRWMY

8. Malloy WW, Ananou AB, DeVan ML, Collins MJ. An in-vitro analysis of the hemostatic properties of universal whole blood and plasma manufactured with the Hemodefend™ Adsorber Device. Transfusion. 2020;60(S5):31A. https://doi.org/10.1111/trf.16041

9. Gupta GK, Henrichs K, Nilsson K, Wagner S, Brown B, Masel D, et al. Reduction of anti-A and anti-B isoagglutinin titers of group O whole blood units employing an ABO antibody immune adsorption column. Transfusion and Apheresis Science. 2023;62(3):103686. https://doi.org/10.1016/j.transci.2023.103686

10. Жибурт ЕБ. Пути повышения качества отечественных препаратов крови. Ремедиум. 2004;4:42–4. EDN: IJWOAV

11. Губанова МН, Коденев АТ, Клюева ЕА, Караваев АВ, Жибурт ЕБ. Вирусинактивированная плазма для переливания. Почему хороший продукт медленно внедряется? Вестник Росздравнадзора. 2009;4:13–7. EDN: KUWFSJ

12. Берковский АЛ, Сергеева ЕВ, Суворов АВ, Гурвиц ИД, Анисимова ЕВ, Савченко ВГ. Получение лиофилизированной плазмы с сохраненной активностью факторов свертывания. Гематология и трансфузиология. 2016;61(4):204–8. EDN: XRYSEN

13. Martinaud C, Civadier C, Ausset S, Verret C, Deshayes AV, Sailoiol A. In vitro hemostatic properties of French lyophilized plasma. Anesthesiology. 2012;117(2):339–46. https://doi.org/10.1097/ALN.0b013e3182608cdd

14. Зиганшина СЕ, Кормщикова ЕС, Калинина ЕН, Росина ЕВ, Коновалова ЕА, Игнатьев СВ и др. Лиофилизированная плазма для оказания экстренной трансфузиологической помощи в экстремальных условиях. Медицина экстремальных ситуаций. 2025;27(3):271–82. https://doi.org/10.47183/mes.2025-248

15. Высочин ИВ, Берковский АЛ, Астрелина ТА, Саркисов АИ. Отечественная лиофилизированная плазма Лиоплазма® для коррекции кровопотери. Сборник материалов Российского форума по тромбозу и гемостазу. М.; 2024. Vysochin IV, Berkovskiy AL, Astrelina TA, Sarkisov AI. Freezedried plasma Lioplasma® for the correction of blood loss. Conference proceedings of the Russian forum on thrombosis and hemostasis. Moscow; 2024 (In Russ.).

16. Gill JC, Endres-Brooks J, Bauer PJ, Marks WJ, Montgomery RR. The effect of ABO blood group on the diagnosis of von Willebrand disease. Blood. 1987;69(6):1691–5. https://doi.org/10.1182/blood.V69.6.1691.1691

17. Souto JC, Almasy L, Muñiz-Diaz E, et al. Functional effects of the ABO locus polymorphism on plasma levels of von Willebrand factor, factor VIII, and activated partial thromboplastin time. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2000;20(8):2024–8. https://doi.org/10.1161/01.ATV.20.8.2024

18. Кривов ИА, Рагимов АА, Салимов ЭЛ. Сравнение влияния лиофилизации на показатели плазменного гемостаза в вирусинактивированной различными методами плазме крови. Современные проблемы науки и образования. 2021;2:122. https://doi.org/10.17513/spno.30630